Wczesne wykrywanie wirusa HIV u noworodków

Miles i in. (Wydanie 4 lutego) sugeruje, że zdysocjowany kompleks immunologiczny antygen p24 z HIV może być wartościowy we wczesnej diagnostyce zakażenia ludzkim wirusem niedoboru odpornościowego (HIV) u dzieci. Nie wierzymy, że dane, które przedstawiają, w wystarczającym stopniu potwierdzają ten wniosek. Nie można ustalić względnej korzyści dysocjacji, ponieważ nie przedstawiono wyników wykrywania antygenu p24 wirusa HIV w nietraktowanych próbkach. Testu blokującego nie wykonano w celu potwierdzenia pozytywnych wyników, które obserwowano nie tylko u zakażonych niemowląt, ale także u 2 z 22 niezainfekowanych niemowląt. Liczba dzieci badanych w ciągu pierwszych 2 miesięcy życia, kiedy diagnoza zakażenia HIV jest najbardziej krytyczna, jest niejasna; średni wiek grupy 78 dzieci wynosił 3,6 roku (zakres od 6 dni do 13 lat).
W trwającym prospektywnym badaniu noworodków urodzonych przez kobiety seropozytywne wobec HIV, ocenialiśmy wykrywanie antygenu p24 z dysocjacją kompleksu immunologicznego i bez niej w celu diagnozy zakażenia HIV. Próbki od 15 zakażonych niemowląt (72 próbki) i 26 niezainfekowanych niemowląt (100 próbek) przebadano pod względem antygenu p24 HIV (HIVAG-1, Abbott Laboratories, Abbott Park, Illinois). Do dysocjacji próbki traktowano buforem glicynowym, a następnie neutralizowano za pomocą zasady TRIS. Wszystkie pozytywne reakcje uzyskane przed leczeniem zostały potwierdzone za pomocą testu blokującego. Po dysocjacji pozytywne reakcje potwierdzono tylko wtedy, gdy wynik przed leczeniem był ujemny. Status HIV dzieci został określony przez izolację wirusa.
Przed dysocjacją antygen p24 wykryto u 8 (53 procent) 15 zakażonych wirusem HIV dzieci badanych w pierwszych dwóch miesiącach życia. Wykryto go w 11 z tych dzieci (73 procent) później w pierwszym roku życia. Po dysocjacji reaktywność zmniejszyła się w pięciu próbkach surowicy i wzrosła w ośmiu. W przypadku sześciu próbek, w których zwiększyła się reaktywność, stosunek próbki do wartości odcięcia, miara gęstości optycznej, która jest używana do zgłaszania wyników testów immunologicznych z udziałem enzymów, po leczeniu został zmieniony z ujemnego na słabo pozytywny (zakres 1,04 do 2,72). Dwa z tych sześciu wyników zostały potwierdzone przez neutralizację; jeden nie był powtarzalny, a trzech nie można było potwierdzić, ponieważ objętość surowicy była niewystarczająca.
Dwie z czterech próbek surowicy od jednego dodatkowego noworodka stały się reaktywne wobec antygenu p24 po dysocjacji kompleksów immunologicznych podczas pierwszych dwóch miesięcy życia; niewystarczająca objętość surowicy wykluczała potwierdzenie tego wyniku. Inne dziecko, które po dwóch miesiącach stało się ujemne dla antygenu p24, pozostało przejściowo pozytywne dopiero po dysocjacji kompleksu immunologicznego. Wszystkie 100 próbek od 26 niezainfekowanych niemowląt wykazywało antygen ujemny zarówno przed, jak i po leczeniu.
Nasze wyniki sugerują, że zysk w wykryciu antygenu p24 HIV po dysocjacji kompleksu immunologicznego jest mały, szczególnie w pierwszych dwóch miesiącach życia. Ponadto denaturacja białek poprzez obróbkę kwasem próbek może wpływać na powtarzalność testu, co jest niezbędne do potwierdzenia próbek reaktywnych. W tym kontekście skuteczność zestawów do wykrywania antygenu p24 HIV należy starannie ocenić, zanim rozwiąże się problem dysocjacji kompleksu immunologicznego w diagnostyce noworodków.
Micheline Fauvel, M.Sc.
Laboratoire de Sante Publique du Quebec, Ste-Anne-de-Bellevue, QC H9X 3R5, Kanada
Denis Henrard, Ph.D.
Abbott Laboratories, Abbott Park, IL 60064
Gilles Delage, MD
Societe Canadienne de la Croix-Rouge, Montreal, QC H1W 1B2, Kanada
Normand Lapointe, MD, M.Sc.
Center Maternel et Infantile sur le SIDA, Hopital Sainte-Justine, Montreal, QC H3T 1C5, Kanada
Odniesienie1 Miles SA, Balden E, Magpantay L, i in. Szybkie testy serologiczne z antygenem p24 HIV zdysocjowanym z kompleksem odpornościowym w celu wczesnego wykrycia zakażenia HIV u noworodków. N Engl J Med 1993; 328: 297-302
Full Text Web of Science MedlineGoogle Scholar
Miles i in. Okazało się, że pięć z ośmiu próbek krwi pępowinowej noworodków z udowodnioną infekcją HIV było pozytywnych, gdy testowano je z użyciem testu z antygenem p24 zdysocjowanym przez kompleks immunologiczny. Dwoje dodatkowych dzieci uzyskało pozytywny wynik w ciągu pierwszego miesiąca życia. W 22 próbkach krwi pępowinowej u niemowląt zakażonych HIV stwierdzono 2 fałszywie dodatnie wyniki. Niestety, badacze nie przedstawili porównywalnych danych dla standardowego testu antygenu p24.
Tabela 1. Tabela 1. Porównanie testów do diagnozy HIV u dzieci. Przebadaliśmy 81 dzieci urodzonych przez matki zakażone wirusem HIV (21 z nich było zakażonych, z których 24 było seronegatywnych po pozytywnym badaniu, a 36 których status pozostaje nieokreślony) za pomocą zwykłego antygenu HIV zdysocjowanego z kompleksem immunologicznym (Abbott HIVAG-1 i Abbott Test Zakłócenia Kompleksu Immunologicznego). Nasze wyniki ogólnie potwierdzają wnioski Milesa i wsp. (Tabela 1). W większości przypadków dzieci były testowane przy wielu okazjach. Wszystkie były testowane z hodowlą HIV i testem antygenu p24. Ponieważ w wielu przypadkach próbki były niewystarczające, nie wszystkie próbki przebadano pod kątem zdysocjowanego kompleksu odpornościowego antygenu HIV.
W naszym ograniczonym doświadczeniu i w przeciwieństwie do innych doniesień, wykrywanie antygenu HIV było dość czułe u zakażonych niemowląt w wieku poniżej trzech miesięcy (czułość, 100 procent zarówno dla testów regularnych, jak i zdysocjowanych kompleksami immunologicznymi). U dzieci w wieku od 4 do 12 miesięcy zwykły test był wrażliwy na 60 do 70 procent, podczas gdy test zdysocjowany przez kompleks immunologiczny był w 100 procentach wrażliwy. Po jednym roku oba testy miały czułość od 40 do 50 procent. Do tej pory nie znaleźliśmy żadnych fałszywie pozytywnych wyników testu w żadnej grupie wiekowej. Zmniejszenie antygenemii z wiekiem może być spowodowane spadkiem miana wirusa przypisywanym chemioterapii przeciwretrowirusowej lub lepszym rozpoznawaniem i powstrzymywaniem wirusa z dojrzewaniem układu odpornościowego niemowlęcia.
Korzystanie z krwi pępowinowej jest kuszące, ponieważ jest łatwe do uzyskania w dużych ilościach. Ale fałszywe pozytywne reakcje są źródłem niepokoju. Reakcje takie mogą być spowodowane albo zanieczyszczeniem krwią matczyną podczas pobierania próbek, albo wyższym wykształceniem związanym z testem dysocjacji kompleksu immunologicznego Coulter (Coulter Immunology, Hialeah, Fla.) (Fiscus SA: dane niepublikowane). Ostrzegamy przed użyciem krwi pępowinowej w diagnozowaniu pediatrycznego zakażenia HIV. Zalecamy również dwa pozytywne wyniki badania (hodowla, test antygenu HIV, zdysocjowany kompleks kompleksu immunologicznego z antygenem HIV lub reakcja łańcuchowa polimerazy) w dwóch oddzielnych próbkach krwi obwodo
[podobne: olej ryżowy na włosy, lekarstwo w zebie przed plombowaniem, praca dla lekarza warszawa ]